Identificação e caracterização de peptídeos recombinantes imunorreativos contra IgG humana de pacientes com a Doença de Chagas pela técnica de "Phage Display"

CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e TecnológicoTrabalho de Conclusão de Curso (Graduação)A Doença de Chagas foi descoberta por Carlos Chagas em 1909, e representa uma importante doença parasitária crônica, causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi. Depois de adquirida, distinguem-se duas fases na doença: aguda e crônica, sendo esta dividida principalmente em formas indeterminada, digestiva e cardíaca. A tecnologia de "Phage Display", exposição de biomoléculas em bacteriófagos, tem sido amplamente utilizada no mapeamento de epítopos de proteínass antigênicas, constituintes de agentes causadores de doenças. Assim, este estudo visou verificar reatividade diferencial dos clones frente aos anticorpos utilizados para seleção e buscar biomarcadores com potencial diagnóstico, bem como avaliar a possibilidade de padrão diferenciado de resposta imunológica entre as principais formas da fase crônica. O "biopanning" foi realizado em placa e, após interação entre anticorpos alvo e fagos, promoveu-se três eluições. A partir do segundo round foi realizada ainda, seleção caracterizada por eluição competitiva com antígeno total de Trypanosoma cruzi. Após o "biopanning", foram sequenciados 67 clones, que demonstraram 50 sequências distintas. Os testes ELISA validaram 25 clones com reatividade significativa diante dos soros positivos. Análises de bioinformática revelaram de epítopos e homologia com proteínas específicas